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      產(chǎn)品詳情
      • 產(chǎn)品名稱(chēng):非洲豬瘟病毒LAMPPCR檢測(cè)試劑盒

      • 產(chǎn)品型號(hào):FS-P64268
      • 產(chǎn)品**:撫生
      • 產(chǎn)品文檔:
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      簡(jiǎn)單介紹:
      非洲豬瘟病毒LAMPPCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
      詳情介紹:

      產(chǎn)品及特點(diǎn):
      1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供病毒樣品。
      2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
      3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
      4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
      5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
      本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
      參數(shù)規(guī)格:
      產(chǎn)品名稱(chēng):非洲豬瘟病毒LAMPPCR檢測(cè)試劑盒
      產(chǎn)品規(guī)格:48T
      產(chǎn)品貨號(hào):FS-P64268
      產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
      產(chǎn)品保存:-20℃保存
      產(chǎn)品有效期:一年
      產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
      運(yùn)輸及保存
      低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
      自備試劑
      DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。

      實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
      1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
      2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
      3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
      4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
      實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
      主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
      主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
      實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
      4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
      使用方法:
      一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
      1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
      2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
      3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
      4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
      5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
      6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
      7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
      二、樣品DNA的制備
      8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
      9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
      三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
      10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
      11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

      酮色林,凱他色林(標(biāo)準(zhǔn)品) Ketanserin 74050-98-9 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

       載玻片細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

      細(xì)胞脂質(zhì)尼羅紅染色試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50次

      稻麥α淀粉酶活性DNS比色法定量檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

      大量蛋白樣品液相法去內(nèi)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:5次

      維生素K1 2,3-環(huán)氧化物 Vitamin K1 2,3-Epoxide 25486-55-9 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

      地美溴胺 Demecarium Bromide  56-94-0 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

       組蛋白H3-T3磷酸化檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等

      噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Hexythiazox solution 78587-05-0 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%

      甲磺酸羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) Ropivacaine mesylate 854056-07-8 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

      細(xì)胞乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

      棕矢車(chē)菊素(標(biāo)準(zhǔn)品) 4',5,7-Trihydroxy-3',6-dimethoxyflavone 18085-97-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

      體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

      6α,3'-對(duì)二羥基紫杉醇 6α,3'-p-Dihydroxy Paclitaxel 157230-10-9 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

      P35蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:25次

      肝素鈉血液抗凝液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:100毫升

      非洲豬瘟病毒LAMPPCR檢測(cè)試劑盒PDC6I/Alix  調(diào)亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白/多巴胺受體相互作用蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

      CDKN1C/p57 Kip2  周期蛋白依賴(lài)激酶抑制因子1C抗體 規(guī)格: 0.1mlMrpL39  線粒體核糖體蛋白L39 規(guī)格: 0.1ml

      Nav1.5/SCN5A  電壓門(mén)控鈉通道5α抗體 規(guī)格: 0.2mlInvolucrin  囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體 0.2ml

      CCL17/ABCD2  胸活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體 規(guī)格: 0.1mlPI3 Kinase p110 beta  磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 規(guī)格: 0.1ml

      PDGFRA  小板源性生因子受體A抗體(PDGFRα) 規(guī)格: 0.1mlPhospho-MYPT1(Thr696)  磷酸化肌球蛋酸酶抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Rabbit Anti-horse IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1mlCYP2C9  細(xì)胞色素P450 2C9抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Rarres3/TIG3  視黃酸受體應(yīng)答蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlNR2D/NMDAR2D  谷氨酸受體2D抗體 規(guī)格: 0.1ml

      MLH1/hMLH 1  錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383)  磷酸化瘤抑制基因PTEN抗體 規(guī)格: 0.1ml

      HAX1  造干細(xì)胞特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlIumbrokinase  蚓激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml

      HES1  轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體 0.2mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/AP  堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2  規(guī)格: 0.1ml

      phospho-CREB-1(Ser133)  磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格: 0.1mlSox2  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Pregnancy zone protein  娠區(qū)帶蛋白PZP抗體 規(guī)格: 0.2mlIL-20R alpha/IL20RA  白介素20受體α鏈抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlIDH2  草酰琥珀酸脫羧酶抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Rabbit Anti-Guinea pig IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.3mlNCC27/CLIC1  氯離子通道蛋白27抗體 規(guī)格: 0.1ml

      MACC1  結(jié)腸轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-BMX/ETK (Tyr40)  磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Brk/PTK6  酪氨酸蛋白激酶6(瘤激酶) 規(guī)格: 0.2mlDRG1  GTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

       


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