培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肺組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
豬原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2252
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常肺組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD31熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對(duì)于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動(dòng)具有重要意義。它還具有代謝功能，可以執(zhí)行一定的非呼吸功能。在肺損傷中，肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞是活性氧類的重要靶細(xì)胞之一。
在肺炎的發(fā)生過程中，神經(jīng)體液介質(zhì)和氧化劑作用于內(nèi)皮細(xì)胞，使得細(xì)胞間隙滲透性增加，蛋白質(zhì)由血液進(jìn)入間質(zhì)。細(xì)胞間隙滲透性的增加導(dǎo)致低氧血癥，出現(xiàn)呼吸窘迫綜合征和非心源性肺水腫。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Mouseanti-humangrowthhormoneantibodyIgGELISAKit
大鼠CD30分子(CD30)elisa分析檢測(cè)試劑盒
CD30 ELISA Kit
人高爾基蛋白73(GP-73)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanGP-73ELISAKit
監(jiān)理蛋白抗體 Anti-Supervillin
受體激活蛋白激酶C1抗體 Anti-RACK1
膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體 Anti-NCKAP1/NAP125
鋅指蛋白321B抗體 Anti-ZNF312B/FEZF1
肝細(xì)胞核因子4γ抗體
HNF4 gamma
鋅指蛋白744抗體
ANKZF1
大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員7(TRPM7)elisa檢測(cè)試劑盒
載玻片細(xì)胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
LB培養(yǎng)基LB Broth 250g
原鈣粘附蛋白β1抗體
PCDHB1
源相互作用蛋白激酶4抗體
HIPK4
腫瘤壞死因子β抗體（TNFβ） Anti-TNF beta
多腺苷二磷酸多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1 Anti-PARP1
環(huán)指蛋白3抗體 Anti-PCGF3/RNF3
多配體聚糖結(jié)合蛋白1抗體 Anti-Syntenin 1
Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgG H&L
豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞5HT ELISA Kit
人干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)elisa分析檢測(cè)試劑盒
CHN 1; A-chimaerin; Alpha-chimerin; Alpha chimerin; ARHGAP2; CHIN_HUMAN; CHN; Chn1; N chimaerin; N chimerin; N-chimaerin; N-chimerin; NC; Rho GTPase-activating protein 2; RHOGAP2.
豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠肝卵圓細(xì)胞
NCC-StC-K140人胃癌細(xì)胞
人正常肝細(xì)胞；QSG-770
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。